腸管の生体イメージング

粘膜免疫の蛍光イメージング論文です。本研究は、定常状態において腸管腔内分子の取り込みと免疫系へのアクセスを生体イメージングにより解明しようとした研究です。正立二光子顕微鏡に設置した特製チャンバーを用い、マウスの腸管を漿膜側と管腔側双方から観察することができる生体イメージング実験システムをセットアップし、４時間程度の継続観察が可能だとのことです。

ローダミン化分子を指標に、小腸の管腔サイドから粘膜固有層サイドへゴブレット細胞内を分子が輸送され、樹状細胞へ受け渡されることを明らかにしました。過去のex vivo研究では、粘膜固有層の樹状細胞が突起を管腔側まで伸ばしてサンプリングすることが示唆されていましたが、今回ゴブレット細胞による輸送が主であることが示されました。腸管という扱いにくい組織の生体イメージングを行い、新規知見を明らかにした点は高く評価できる研究です。

樹状細胞サブセットのイメージングには、YFP（CD11c+）とGFP（CX3CR1+）を用い、ダブルポジティブとシングルポジティブで識別しました。二光子顕微鏡イメージングのデータ（図３c）を載せていますが、図ではYFP+GFP+とYFP+GFP-の区別が今ひとつはっきりしないように見えます。二光子顕微鏡でどの程度蛍光色素の重ね合わせが識別可能なのか、詳しい先生がおられたらアドバイスいただければありがたいです。