FRETカルシウムセンサーを用いたT細胞活性化の観察

CFPとYFPをもとにトロポニンCのカルシウム結合部位を持つFRETカルシウムセンサーTN-XXLをベースとして、さまざまな改良を加えたTwitch-1CDを作製し、それをT細胞にレトロウィルスベクターを使って導入し、それを個体に導入して自己免疫疾患のモデル系でT細胞の動態と活性化を2光子レーザー顕微鏡にて検出可能にしています。なお、Twitch-1CDは従来のものに比べカルシウムへの親和性が高くなっています。

抗原ペプチドによるリンパ節でのT細胞の動態、および活性化、さらには自己免疫疾患のモデルの1つである実験的自己免疫性脳脊髄炎（EAE）を利用して、ミエリン特異的なT細胞をレシピエントに導入して、中枢神経系での自己反応性のT細胞の動態、カルシウムシグナリングを見ています。リンパ節では、抗原ペプチドの静脈注射によりT細胞の動きが抗原を提示するDCと会合することにより制限され、細胞内カルシウム濃度の上昇がみられています。またEAEの系では、くも膜下腔に侵入してきた自己反応性T細胞が活性化される様子を生体イメージングでとられています。T細胞のように動きのある細胞でもFRETセンサーを使えば、動きによる蛍光強度の変化を補正できるのでカルシウムシグナリングのin vivoイメージングに適していると思われます。

今後、今回の論文のように、細胞の活性化を可視化した蛍光プローブが各種疾患の経時的な病態解明にも益々利用されていくと思われます。